Né le 23 mai 1951 à Athènes, Antonis Samaras a fait ses études dans la capitale grecque avant de partir aux Etats-Unis pour des études en Economie au Amherst College puis à l'Université du Harvard où il obtient un MBA en Administration des entreprises, faisant son doctorat sur "Les relations des compagnies multinationales avec les gouvernements".

Dès son retour en Grèce, il est élu député de Messinia, sud-ouest du Péloponnèse, sous les couleurs de Nea Dimokratia (ND), en 1977, âgé alors de 26 ans.  Il sera depuis réélu député de cette province sans interruption.

En juillet 1989, il est nommé ministre des Finances sous le gouvernement Tzannetakis et en novembre de la même année il devient ministre des Affaires étrangères du gouvernement oecuménique ND-PASOK poste qu'il conservera après les élections d'avril 1990 sous le gouvernement ND de Konstantinos Mitsotakis avec qui il se trouve en désaccord à propos du différend avec l'ancienne république de Macédoine (FYROM) sur l'appellation définitive de ce pays voisin. Antonis Samaras dénonçant les concessions de la Grèce à la FYROM quittera alors le gouvernement et la Nea Dimokratia pour former en juin 1993 son propre parti, la Politiki Anoixi (le Printemps Politique), une appellation "soufflée" par le prix Nombel de la Poésie Odysseas Elytis qui, par ailleurs, avait soutenu ouvertement la nouvelle formation.

Malgré les premiers succès électoraux, la Politiki Anoixi n'arrivera pas à se maintenir dans l'échiquier politique grec, passant de 4,88% aux élections de 1993 et 8,7% en 1994 à 2,3% à celles de 1999.

Le parti ne participera pas aux élections de 2000 et Samaras appela à voter pour la ND qu'il rejoint pour les élections de 2004 et dont il va conduire la liste aux élections Européenne. Réélu député de Messine en 2007, il sera nommé ministre de la Culture en janvier 2009 dans le dernier gouvernement de Costas Caramanlis, poste qu'il conservera jusqu'aux élections d'octobre 2009 que la ND perd. Suite à la démission de Caramanlis, Antonis Samaras se déclare candidat à la présidence de la ND, lors des élections qui auront lieu le 29 novembre 2009, pour la première fois dans l'histoire du parti avec la participation de la base. Il l'emportera les élections avec une avance de huit points face à dora Bakoyannis, fille de l'ancien premier minsitre Konstantinos Mitsotakis.

Politiquement, il se situe dans le centre-droit, prônant un libéralisme moderne à visage social, résumé dans une des phrases de sa campagne pour la présidence de la ND : "Nous ne laisserons pas la Patrie à l'extrême droite, nous ne laisserons pas la Justice sociale à l'extrême gauche". Ses détracteurs lui créditent un certain populisme et l'accusent de conservatisme.

Antonis Samaras est marié à Georgia Kritikou et père d'un garçon et d'une fille Lena, née en 1991, et d'un garçon Kostas, né en 1998. Il est lui-même petit fils d'un ancien député de Thessalonique, Alexandros Zannas et neveu de l'ancien député de Messinia, Georgios Samaras. Du côté de sa mère il descend de la famille Benakis et il est arrière petit fils de l'écrivain Pinelopi Delta.

Il parle, outre le grec, l'anglais, le français et l'italien.